一種ABO血型檢測卡的制備方法,包括含有六個微柱的檢測卡,其特征在于:所述六個微柱中前三個微柱分別裝有等量的抗A凝膠、抗B凝膠和抗D凝膠,其余三個微柱裝有等量的空白凝膠,其通過以下方法制備而成:
(1)葡聚糖凝膠的溶脹:選用至少兩種交聯(lián)葡聚糖凝膠進行混合,然后加入純化水中進行充分懸浮溶脹,再用純化水洗滌去除破碎顆粒,得到大小均勻、呈完整球形的葡聚糖凝膠顆粒;
(2)制備各抗體稀釋液:抗A稀釋液:以生理鹽水為基液,其中含有乙二胺四乙酸二鉀鹽10?15g/L、牛血清白蛋白20?25g/L、蔗糖15?20g/L,稀釋液的pH值為6.6?6.8;抗B稀釋液:以生理鹽水為基液,其中含有乙二胺四乙酸二鉀鹽15?20g/L、牛血清白蛋白15?20g/L、蔗糖25?30g/L,稀釋液的pH值為6.6?6.8;抗D稀釋液:以磷酸鹽緩沖液為基液,其中含有乙二胺四乙酸二鉀鹽10?15g/L、牛血清白蛋白35?40g/L,稀釋液的pH值為6.6?6.8;空白凝膠洗滌緩沖液:以純化水為溶劑,緩沖液中含有氯化鈉1.75g?2.07g/L、磷酸氫二鈉0.185?0.219g/L、磷酸二氫鈉0.203?0.24g/L、甘氨酸18?21g/L;并調(diào)節(jié) pH值為6.6?6.8;
(3)制備各抗體工作液:取抗A單克隆抗體濃縮液與抗A稀釋液進行混合,使得到的抗A單克隆抗體工作液的效價≥128;取抗B單克隆抗體濃縮液與抗B稀釋液進行混合,使得到的抗B單克隆抗體工作液的效價≥128;取抗D單克隆抗體濃縮液與抗D稀釋液進行混合,使得到的抗D單克隆抗體工作液的效價≥64;
(4)凝膠洗滌:取六份等量的葡聚糖凝膠顆粒,其中三份分別用等量的抗A稀釋液、抗B稀釋液和抗D稀釋液進行洗滌至少三次,再加入相對應(yīng)的抗A單克隆抗體工作液、抗B單克隆抗體工作液和抗D單克隆抗體工作液進行混合,得到抗A凝膠、抗B凝膠和抗D凝膠;再將另外三份葡聚糖凝膠顆粒分別用等量的空白凝膠洗滌緩沖液進行洗滌至少三次,再加入空白凝膠洗滌緩沖液進行混合,得到三份空白凝膠;
(5)分裝:按照每管24?32微升的量,將抗A凝膠、抗B凝膠、抗D凝膠依次加到空白檢測卡的前三個微柱中,將三份空白凝膠分別加到空白檢測卡的后三個微柱中,形成ABO正反定型及RhD血型檢測卡。
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